2017年第二季度(2017年3月~2017年5月),碩騰(中國(guó))豬病診斷實(shí)驗(yàn)室共收到全國(guó)23個(gè)省市(含直轄市、自治區(qū))規(guī)?;i場(chǎng)33715份樣品,并根據(jù)豬場(chǎng)的實(shí)際情況,對(duì)樣品進(jìn)行了豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV)、豬瘟病毒(CSFV)、豬偽狂犬病病毒(PRV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)抗原及抗體的檢測(cè)。現(xiàn)將檢測(cè)結(jié)果歸納總結(jié),以期為規(guī)?;i場(chǎng)疫病防控提供參考。
本期跟養(yǎng)豬小伙伴分享的是來(lái)自125個(gè)豬場(chǎng)9754份血清樣品中CSFV抗體和39個(gè)豬場(chǎng)228份樣品中CSFV抗原的檢測(cè)結(jié)果。
1 材料與方法
1.1 樣品來(lái)源及類(lèi)型
樣品全部來(lái)自免疫背景清楚的規(guī)?;i場(chǎng),樣品類(lèi)型為血樣或組織病料。具體分布省份如圖1-1。

圖1-1 樣品分布(橙紅色區(qū)域代表樣品來(lái)源省份)
1.2 樣品生產(chǎn)階段分布
樣品按公豬、不同胎次經(jīng)產(chǎn)母豬、不同周齡商品豬以及后備公、母豬等不同生產(chǎn)階段隨機(jī)采樣。
1.3 試劑及檢測(cè)方法
CSFV抗體ELISA檢測(cè)試劑盒(韓國(guó)JBT),抗原檢測(cè)相關(guān)試劑盒(北京全式金公司)。所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
2 結(jié)果與分析
2.1 CSFV抗體
針對(duì)CSFV抗體,本季度共檢測(cè)了125個(gè)豬場(chǎng)9754份血清樣品,樣品的CSFV抗體陽(yáng)性率70.99%(6924/9754)。
我們首先分析了本季度不同生產(chǎn)階段種豬群和不同周齡商品豬群CSFV抗體陽(yáng)性率變化,之后比較了同一階段豬群不同豬場(chǎng)間CSFV抗性陽(yáng)性率差異,最后分析了CSFV疫苗不同豬群的反應(yīng)模式。
公豬樣品和后備母豬樣品CSFV抗體陽(yáng)性率分別為84.87%(600/707)和87.10%(783/899);1~3胎低胎齡、4~6胎中胎齡和6胎以上高胎齡母豬樣品CSFV抗體陽(yáng)性率分別為84.1%(1093/1300)、81.0%(793/980)、78.8%(316/401)(圖2-1、圖2-2)。

圖2-1 不同生產(chǎn)階段種豬群CSFV抗體陽(yáng)性率

圖2-2 不同生產(chǎn)階段種豬群CSFV抗體阻斷率均值及離散度
在所檢樣品中商品豬樣品CSFV抗體陽(yáng)性率為61.08%(3339/5467)。6周齡以?xún)?nèi)豬只的CSFV抗體陽(yáng)性率不斷下降,6周齡時(shí)抗體陽(yáng)性率最低;隨后,6~12周齡豬群CSFV抗體陽(yáng)性率不斷升高,并在12周齡時(shí)達(dá)到最高,12~16周齡略有下降,16~20周齡上升;20周齡豬群的CSFV抗體陽(yáng)性率為76.0%,20周齡以上呈下降趨勢(shì)(圖2-3)。

圖2-3 不同生產(chǎn)階段商品豬CSFV抗體陽(yáng)性率
隨后,為了解不同豬場(chǎng)同一階段豬群CSFV抗體陽(yáng)性率差異,我們分析了74個(gè)豬場(chǎng)間不同生產(chǎn)階段豬群CSFV抗體陽(yáng)性率(豬場(chǎng)選擇標(biāo)準(zhǔn):a、送檢樣品采自不同生產(chǎn)階段豬群;b、每一生產(chǎn)階段樣本數(shù)量≥5個(gè);c、免疫記錄清楚)。
結(jié)果表明不同豬場(chǎng)同一階段豬群CSFV抗體陽(yáng)性率差異較大。種豬群中后備豬群和6胎以上母豬群CSFV抗體陽(yáng)性率場(chǎng)間差異高于其它生產(chǎn)階段,商品豬群中2~12周齡豬群CSFV抗體陽(yáng)性率場(chǎng)間差異較大。值得關(guān)注的是20周齡以上豬群CSFV抗體陽(yáng)性率場(chǎng)間存在差異(圖2-4)。

圖2-4 場(chǎng)間不同生產(chǎn)階段豬群CSFV抗體陽(yáng)性率差異
最后根據(jù)生長(zhǎng)豬群接種CSFV疫苗后3個(gè)目標(biāo)階段的抗體陽(yáng)性率,我們分析上述74個(gè)豬場(chǎng)生長(zhǎng)豬免疫豬瘟疫苗后抗體反應(yīng)模式。3個(gè)目標(biāo)階段及其陽(yáng)性率高低判斷臨界標(biāo)準(zhǔn)如下:8周齡或首免后4周,60%;10~14周齡或二免后4周,80%;20~24周齡,70%。如果某階段抗體陽(yáng)性率等于或高于相應(yīng)階段的臨界標(biāo)準(zhǔn),則將該階段抗體陽(yáng)性率定義為高,反之,則定義該階段陽(yáng)性率為低。
基于此標(biāo)準(zhǔn)歸納為6種反應(yīng)模式,不同反應(yīng)模式豬場(chǎng)的占比如下:低-高-低(21.62%),2:低-低-高(16.22%),3:低-低-低(10.81%),4:低-高-高(17.57%),5:高-高-高(25.68%),6:其它模式(8.11%);模式5,1,4出現(xiàn)比例較高,其中模式5出現(xiàn)的比例最高(見(jiàn)圖2-5)。

圖2-5 CSFV疫苗免疫后常見(jiàn)的抗體反應(yīng)模式及出現(xiàn)比例
為了從CSFV抗體數(shù)值了解不同階段豬群的抗體差異,我們分別統(tǒng)計(jì)了不同周齡生長(zhǎng)豬和不同場(chǎng)間同一階段豬群CSFV抗體阻斷率的變化趨勢(shì)。6周齡以?xún)?nèi)豬只的CSFV抗體阻斷率均值不斷下降,離散度較大;6周齡時(shí)抗體阻斷率均值最低,離散度最大;6~12周齡豬群CSFV抗體阻斷率均值不斷升高,并在12周齡時(shí)達(dá)到最高,12~16周齡略有下降,16~20周齡上升;20周齡以上CSFV抗體阻斷率離散度增大(圖2-6)。

圖2-6 不同生產(chǎn)階段商品豬群CSFV抗體阻斷率均值及離散度
隨后我們進(jìn)一步分析了上述74個(gè)豬場(chǎng)間不同生產(chǎn)階段豬群CSFV抗體阻斷率差異。不同豬場(chǎng)同一階段豬群CSFV抗體阻斷率均值差異較大。種豬群中后備豬群和6胎以上母豬群CSFV抗體阻斷率場(chǎng)間差異高于其它生產(chǎn)階段,商品豬群中4~16周齡豬群CSFV抗體阻斷率差異場(chǎng)間差異較大(圖2-7)。

圖2-7 場(chǎng)間不同生產(chǎn)階段豬群CSFV抗體阻斷率差異
2.2 CSFV抗原
我們通過(guò)檢測(cè)CSFV E2 基因判斷待檢樣品是否含有CSFV。針對(duì)CSFV抗原,本季度共檢測(cè)了39個(gè)豬場(chǎng),場(chǎng)陽(yáng)性率為5.13%(2/39);檢測(cè)樣品228份(正常血清147份,病豬血樣46份,組織病料159份,部分豬場(chǎng)相同周次血清、組織合樣),樣本陽(yáng)性率為2.6%(6/228)。
3 討論
本季度種豬群抗體陽(yáng)性率大部分高于80%,商品豬樣品CSFV抗體陽(yáng)性率為61.08%,而樣品的CSFV抗原檢出率僅2.6%,這說(shuō)明檢測(cè)場(chǎng)種豬群的CSFV疫苗免疫效果較好,豬群感染CSFV野毒的幾率非常??;而商品豬群的免疫效果稍差,這可能與商品豬所用疫苗不同和免疫程序不合理導(dǎo)致的。
種豬群中生產(chǎn)母豬隨著胎次升高,CSFV抗體陽(yáng)性率、阻斷率均值均出現(xiàn)下降,盡管該結(jié)果與我們最初的認(rèn)識(shí)有出入,卻提示我們要特別關(guān)注高胎次母豬CSFV的監(jiān)測(cè),加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和優(yōu)化母豬胎齡結(jié)構(gòu)。
商品豬階段,6周齡以前,CSFV抗體陽(yáng)性率及阻斷率均值不斷地下降,這可能是由母源抗體衰減導(dǎo)致的,6周齡左右是一個(gè)免疫空窗期,豬群在該階段感染CSFV野毒的風(fēng)險(xiǎn)較大;而20周齡及以上階段陽(yáng)性率和阻斷率均值下降,離散度顯著增加,提示我們加強(qiáng)飼養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)育肥豬和后備母豬的CSFV抗體監(jiān)測(cè)。
不同豬場(chǎng)相同階段豬群的CSFV抗體陽(yáng)性率存在較大的差異,這表明除了豬只差異外,疫苗質(zhì)量和免疫程序的優(yōu)劣也影響著母源抗體持續(xù)時(shí)長(zhǎng)和商品豬CSFV抗體陽(yáng)性率。
豬瘟疫苗免疫后合理的反應(yīng)模式為模式5,即高-高-高,但從圖2-5可以看出模式5只占25%,提示豬場(chǎng)在制定免疫程序時(shí)要注意母源抗體的持續(xù)時(shí)間,監(jiān)測(cè)生產(chǎn)過(guò)程中其他免疫抑制性疾病的干擾和其它影響免疫效果的因素。
4 總結(jié)
不同階段豬群CSFV抗體的陽(yáng)性率均不太理想(約有75%豬場(chǎng)商品豬CSFV抗體不理想,并未表現(xiàn)高-高-高抗體反應(yīng)模式),6周齡左右是明顯免疫空窗期;豬場(chǎng)在制定免疫程序時(shí)要注意母源抗體的持續(xù)時(shí)間,注意免疫時(shí)是否有其他免疫抑制性疾病干擾并影響免疫效果。
